造成樣本背景被染色原因是什么？

艾托金生物醫(yī)藥（蘇州）有限公司2020-08-17

造成樣本背景被染色原因與解決方案如下：

1、抗原修復(fù)過度；抗體濃度過高或孵育時(shí)間過長、孵育溫度過高
解決方案：嚴(yán)格控制抗原修復(fù)時(shí)間；根據(jù)抗體說明書摸索出適宜的抗體濃度，或縮短抗體孵育時(shí)間、降低孵育溫度。

2、清洗不充分
解決方案：增加清洗時(shí)間和次數(shù)。

3、顯色時(shí)間過長
解決方案：顯微鏡下顯色，控制顯色強(qiáng)度。

4、切片樣本中有組織壞死區(qū)
解決方案：忽略該部分染色，或重新取材。

5、切片樣本有褶皺、刀痕或撕裂
解決方案：重新切片，確保待測組織切片平整、完整。

6、組織切片出現(xiàn)干片
解決方案：染色過程中應(yīng)全程保持切片濕潤，禁止干片。

7、內(nèi)源性過氧化物酶顯色（通常發(fā)生在紅細(xì)胞、炎癥細(xì)胞、壞死組織中）
解決方案：使用過氧化物酶阻斷劑進(jìn)行阻斷；延長阻斷時(shí)間；使用非過氧化物酶二抗檢測系統(tǒng)。

8、內(nèi)源性生物素顯色（通常出現(xiàn)在高代謝組織樣本中）
解決方案：使用非生物素二抗檢測系統(tǒng)。